Solución innovadora de diagnóstico de TB e DR-TB mediante #Macro & Micro -Test!

Unha nova arma para o diagnóstico da tuberculose e a detección de resistencia a drogas: unha secuenciación dirixida de nova xeración (tNGS) combinada coa aprendizaxe automática para o diagnóstico da hipersensibilidade á tuberculose

Informe de literatura: CCa: un modelo de diagnóstico baseado en tNGS e aprendizaxe automática, que é adecuado para persoas con menos tuberculose bacteriana e meninxite tuberculosa.

Título da tese: Secuenciación de próxima xeración e aprendizaxe automática dirixidas a tuberculosos: unha estratexia de diagnóstico ultrasensible para os tubulares pulmonares paucíficos e a meninxite tubular.

Periódico: 《Clinica Chimica Acta》

SE: 6.5

Data de publicación: xaneiro de 2024

Combinado coa Academia de Ciencias da Universidade de Chinesa e o Hospital de Peito de Pequín da Universidade Médica Capital, Macro & Micro-Test estableceu un modelo de diagnóstico da tuberculose baseado na nova xeración de tecnoloxía de secuenciación dirixida (tNGS) e método de aprendizaxe automática, que proporcionaba un nivel ultra-alto. sensibilidade de detección para a tuberculose con poucas bacterias e meninxite tuberculosa, proporcionou un novo método de diagnóstico de hipersensibilidade para o diagnóstico clínico de dous tipos de tuberculose e axudou ao diagnóstico preciso, á detección da resistencia aos medicamentos e ao tratamento da tuberculose.Ao mesmo tempo, compróbase que o ADNc plasmático do paciente pode utilizarse como un tipo de mostra axeitado para a toma de mostras clínicas no diagnóstico de TBM.

Neste estudo utilizáronse 227 mostras de plasma e líquido cefalorraquídeo para establecer dúas cohortes clínicas, nas que as mostras de cohortes de diagnóstico de laboratorio foron utilizadas para establecer o modelo de aprendizaxe automática de diagnóstico da tuberculose e as mostras de cohortes de diagnóstico clínico para verificar o establecido. modelo de diagnóstico.Todas as mostras foron dirixidas por primeira vez a un grupo de sondas de captura dirixida especialmente deseñado para Mycobacterium tuberculosis.Despois, baseándose nos datos de secuenciación de TB-tNGS, o modelo de árbore de decisión utilízase para realizar unha validación cruzada de 5 veces nos conxuntos de adestramento e validación da cola de diagnóstico de laboratorio e obtéñense os limiares de diagnóstico das mostras de plasma e de líquido cefalorraquídeo.O limiar obtido incorpórase a dous conxuntos de probas de cola de diagnóstico clínico para a súa detección, e o rendemento diagnóstico do alumno avalíase mediante a curva ROC.Finalmente, obtívose o modelo de diagnóstico da tuberculose.

Fig. 1 diagrama esquemático do deseño da investigación

Resultados: Segundo os limiares específicos da mostra de ADN de LCR (AUC = 0,974) e da mostra de ADNc plasma (AUC = 0,908) determinados neste estudo, entre 227 mostras, a sensibilidade da mostra de LCR foi do 97,01%, a especificidade do 95,65% e a sensibilidade e especificidade da mostra de plasma foron do 82,61% e do 86,36%.Na análise de 44 mostras pareadas de cfDNA plasmático e ADN de líquido cefalorraquídeo de pacientes con TBM, a estratexia diagnóstica deste estudo ten unha alta consistencia do 90,91% (40/44) en plasma cfDNA e ADN do líquido cefalorraquídeo, e a sensibilidade é do 95,45% (42/44).En nenos con tuberculose pulmonar, a estratexia diagnóstica deste estudo é máis sensible ás mostras de plasma que os resultados da detección Xpert das mostras de zume gástrico dos mesmos pacientes (28,57% VS 15,38%).

Fig. 2 Rendemento da análise do modelo de diagnóstico da tuberculose para mostras de poboación

Fig. 3 Resultados diagnósticos de mostras pareadas

Conclusión: neste estudo estableceuse un método de diagnóstico hipersensible para a tuberculose, que pode proporcionar unha ferramenta de diagnóstico coa maior sensibilidade de detección para pacientes clínicos con tuberculose oligobacilar (cultivo negativo).A detección de tuberculose hipersensible baseada no ADNc plasmático pode ser un tipo de mostra axeitado para o diagnóstico da tuberculose activa e da meninxite tuberculosa (as mostras de plasma son máis fáciles de recoller que o líquido cefalorraquídeo para os pacientes sospeitosos de tuberculose cerebral).

Ligazón orixinal: https://www.sciencedirect.com/science/article/pii/s0009898123004990?a través de% 3Dihub

Breve introdución dos produtos de detección da serie Macro e Micro-Test de tuberculose

Tendo en conta a complicada situación das mostras dos pacientes con tuberculose e as diversas necesidades, Macro & Micro-Test ofrece un conxunto completo de solucións NGS para a extracción de licuefacción a partir de mostras de esputo, construción e secuenciación de bibliotecas de Qualcomm e análise de datos.Os produtos abarcan o diagnóstico rápido de pacientes con tuberculose, a detección de resistencia a medicamentos da tuberculose, a tipificación de mycobacterium tuberculosis e NTM, o diagnóstico de hipersensibilidade de tuberculose bacteriana negativa e persoas tuberculosas, etc.

Kits de detección en serie para tuberculose e micobacterias:

Número de elemento nome do produto contido das probas do produto tipo de mostra modelo aplicable
HWTS-3012 Agente de liberación de mostras Usado no tratamento de licuefacción de mostras de esputo, obtivo un número de rexistro de primeira clase, Sutong Machinery Equipment 20230047. esputo
HWTS-NGS-P00021 Kit de detección de cantidades Qualcomm para tuberculose hipersensible (método de captura de sonda) Detección de hipersensibilidade non invasiva (biopsia líquida) para tuberculose pulmonar negativa bacteriana e nódulos cerebrais;As mostras de persoas sospeitosas de estar infectadas con micobacterias tuberculosas ou non tuberculosas analizáronse mediante metaxenómica de secuenciación de alta profundidade, e a información de detección de se micobacterias tuberculosas ou non tuberculosas estaban infectadas e a principal información de primeira liña sobre resistencia a medicamentos de micobacterias tuberculosas. foron proporcionados. Sangue periférico, líquido de lavado alveolar, hidrotórax e ascitis, mostra de punción de foco, líquido cefalorraquídeo. Segunda xeración
HWTS-NGS-T001 Kit de detección de resistencia a fármacos e tipificación de Mycobacterium (método de secuenciación de amplificación múltiple) Proba de tipificación de Mycobacterium, incluíndo MTBC e 187 NTM;A detección de resistencia a fármacos de Mycobacterium tuberculosis abarca 13 fármacos e 16 sitios de mutación central dos xenes de resistencia a fármacos. Esputo, líquido de lavado alveolar, hidrotórax e ascitis, mostra de punción de foco, líquido cefalorraquídeo. Plataforma dual de segunda/terceira xeración

Destacados: HWTS-NGS-T001 Kit de detección de resistencia a fármacos e tipificación de Mycobacterium (método de amplificación múltiplex)

Introdución do produto

O produto está baseado nos principais fármacos de primeira e segunda liña descritos nas directrices de tratamento da TB da OMS, macrólidos e aminoglicósidos que se usan habitualmente nas directrices de tratamento de NTM, e os sitios de resistencia aos fármacos abarcan todo un grupo de sitios relacionados coa resistencia aos fármacos no país. Catálogo de mutacións do complexo Mycobacterium tuberculosis da OMS, así como outros xenes de resistencia aos medicamentos e sitios de mutación informados segundo a investigación e as estatísticas de literaturas de alta puntuación no país e no estranxeiro.

A identificación da tipificación baséase nas cepas NTM resumidas nas directrices NTM publicadas polo Chinese Journal of Tuberculosis and Respiratory Diseases e o consenso de expertos.Os cebadores de tipificación deseñados poden amplificar, secuenciar e anotar máis de 190 especies NTM.

Mediante a tecnoloxía de amplificación por PCR múltiple dirixida, os xenes de xenotipificación e os xenes resistentes aos fármacos de Mycobacterium foron amplificados mediante PCR múltiple e obtívose a combinación de amplicón dos xenes diana a detectar.Os produtos amplificados pódense construír en bibliotecas de secuenciación de alto rendemento de segunda ou terceira xeración, e todas as plataformas de secuenciación de segunda e terceira xeración poden someterse a unha secuenciación en profundidade para obter a información de secuencias dos xenes diana.Ao comparar coas mutacións coñecidas contidas na base de datos de referencia integrada (incluíndo o catálogo de mutacións do complexo Mycobacterium tuberculosis da OMS e a súa relación coa resistencia aos fármacos), determináronse as mutacións relacionadas coa resistencia aos fármacos ou a susceptibilidade dos fármacos antituberculosos.Combinado coa solución de tratamento de mostras de esputo de apertura automática de Macro e Micro-Test, resolveuse o problema da baixa eficiencia de amplificación de ácidos nucleicos das mostras clínicas de esputo (dez veces maior que a dos métodos tradicionais), polo que se pode detectar a secuenciación da resistencia a medicamentos. aplicado directamente a mostras clínicas de esputo.

Rango de detección de produtos

34xenes relacionados coa resistencia a medicamentos18fármacos antituberculosos e6Detectáronse drogas NTM, cubrindo297sitios de resistencia a medicamentos;Dez tipos de Mycobacterium tuberculosis e máis de190detectáronse tipos de NTM.

Táboa 1: Información de 18+6 Drogas +190+NTM

Vantaxe do produto

Forte adaptabilidade clínica: as mostras de esputo pódense detectar directamente cun axente de autolicuación sen cultivo.

A operación experimental é sinxela: a primeira rolda de operación de amplificación é sinxela e a construción da biblioteca complétase en 3 horas, o que mellora a eficiencia do traballo.

Dixitación completa e resistencia a medicamentos: cubrindo os sitios de tipificación e resistencia a medicamentos de MTB e NTM, que son os puntos clave de preocupación clínica, dixitación precisa e detección de resistencia a medicamentos, soporte de software de análise independente e xeración de informes de análise cun só clic.

Compatibilidade: compatibilidade de produtos, adaptándose ás principais plataformas ILM e MGI/ONT.

Especificación do produto

Código do produto nome do produto Plataforma de detección especificacións
HWTS-NGS-T001 Kit de detección de resistencia a fármacos e tipificación de Mycobacterium (método de amplificación múltiplex) ONT、Illumina、MGI、Salus pro 16/96rxn

Hora de publicación: 23-xan-2024