Gene de resistencia a carbapenem (KPC/NDM/OXA 48/OXA 23/VIM/IMP)
Nome do produto
HWTS-OT045 Kit de detección de xenes de resistencia a carbapenem (KPC/NDM/OXA 48/OXA 23/VIM/IMP) (PCR de fluorescencia)
Epidemioloxía
Os antibióticos carbapenémicos son antibióticos β-lactámicos atípicos co espectro antibacteriano máis amplo e a actividade antibacteriana máis forte.Debido á súa estabilidade á β-lactamasa e á súa baixa toxicidade, converteuse nun dos fármacos antibacterianos máis importantes para o tratamento de infeccións bacterianas graves.Os carbapenémicos son altamente estables ás β-lactamases de espectro estendido (ESBL) mediadas por plásmidos, cromosomas e cefalosporinases mediadas por plásmidos (enzimas AmpC).
Canle
PCR-Mix 1 | PCR-Mix 2 | |
FAM | IMP | VIM |
VIC/HEX | Control Interno | Control Interno |
CY5 | NDM | KPC |
ROX | OXA48
| OXA23 |
Parámetros técnicos
Almacenamento | ≤-18 ℃ |
Vida útil | 12 meses |
Tipo de espécimen | Esputo, colonias puras, hisopo rectal |
Ct | ≤36 |
CV | ≤5,0 % |
LoD | 103CFU/ml |
Especificidade | a) O kit detecta as referencias negativas normalizadas da empresa, e os resultados cumpren os requisitos das referencias correspondentes. b) Os resultados da proba de reactividad cruzada mostran que este kit non ten reaccións cruzadas con outros patóxenos respiratorios, como Klebsiella pneumoniae, Acinetobacter baumannii, Pseudomonas aeruginosa, Streptococcus pneumoniae, Neisseria meningitidis, Staphylococcus aureus, Klebsiella, Acinetobacter baumannii, junii, Acinetobacter haemolyticus, Legionella pneumophila, Escherichia coli, Pseudomonas fluorescens, Candida albicans, Chlamydia pneumoniae, Adenovirus respiratorio, Enterococcus ou mostras que conteñan outros xenes resistentes aos medicamentos CTX, mecA, SME, SHV, etc. c) Anti-interferencia: mucina, minociclina, gentamicina, clindamicina, imipenem, cefoperazona, meropenem, clorhidrato de ciprofloxacino, levofloxacino, ácido clavulánico, roxitromicina son seleccionados para a proba de interferencia, e os resultados mostran que as substancias interferentes mencionadas anteriormente non teñen ningunha reacción interferente. para a detección de xenes de resistencia a carbapenémicos KPC, NDM, OXA48, OXA23, VIM e IMP. |
Instrumentos aplicables | Sistemas de PCR en tempo real Applied Biosystems 7500 Sistemas de PCR en tempo real QuantStudio®5 Sistemas de PCR en tempo real SLAN-96P (Hongshi Medical Technology Co., Ltd.) Sistema de PCR en tempo real LightCycler®480 Sistema de detección de PCR en tempo real LineGene 9600 Plus (FQD-96A,HangzhouTecnoloxía Bioer) Ciclador térmico cuantitativo en tempo real MA-6000 (Suzhou Molarray Co., Ltd.) Sistema de PCR en tempo real BioRad CFX96 Sistema de PCR en tempo real BioRad CFX Opus 96 |
Fluxo de traballo
Opción 1.
Reactivo de extracción recomendado: Macro & Micro-Test General DNA/RNA Kit (HWTS-301)9-50, HWTS-3019-32, HWTS-3019-48, HWTS-3019-96) (que se pode usar co extractor automático de ácidos nucleicos Macro e Micro-Test (HWTS-3006C, HWTS-3006B)) de Jiangsu Macro & Micro-Test Med-Tech Co., Ltd.. Engade 200 μl de solución salina normal a precipitado do talo.Os pasos posteriores deben seguir as instrucións para a extracción e o volume de elución recomendado é100 μl.
Opción 2.
Reactivo de extracción recomendado: Reactivo de extracción ou purificación de ácidos nucleicos (YDP302) de Tiangen Biotech (Beijing) Co., Ltd. A extracción debe iniciarse de acordo co paso 2 das instrucións de uso (engade 200 μL de tampón GA ao precipitado de talo). , e axita ata que o talo estea completamente suspendido).Use auga libre de RNase/DNase para a elución e o volume de elución recomendado é de 100 μl.
Opción 3.
Reactivo de extracción recomendado: Reactivo de liberación de mostras de macro e microtest.A mostra de esputo debe lavarse engadindo 1 ml de solución salina normal ao precipitado de talo tratado anteriormente mencionado, centrifugando a 13000 r/min durante 5 minutos e descartando o sobrenadante (manteña 10-20 µL de sobrenadante).Para a colonia pura e o cotonete rectal, engade 50 μL de reactivo de liberación de mostra directamente ao precipitado de talo tratado anteriormente mencionado, e os pasos posteriores deben extraerse segundo as instrucións de uso.