Xene de resistencia ao carbapenem (KPC/NDM/OXA 48/OXA 23/VIM/IMP)
Nome do produto
HWTS-OT045 Xene de resistencia ao carbapenem (KPC/NDM/OXA 48/OXA 23/VIM/IMP) Kit de detección (PCR de fluorescencia)
Epidemioloxía
Os antibióticos de carbapenem son antibióticos β-lactam atípicos co espectro antibacteriano máis amplo e a actividade antibacteriana máis forte. Debido á súa estabilidade á β-lactamase e á baixa toxicidade, converteuse nun dos fármacos antibacterianos máis importantes para o tratamento de infeccións bacterianas graves. Os carbapenems son altamente estables para β-lactamases de espectro estendido mediado por plásmidos (ESBLS), cromosomas e cefalosporinases mediadas por plásmidos (encimas AMPC).
Canle
| PCR-Mix 1 | PCR-Mix 2 | |
| Fam | Imp | Vim |
| Vic/Hex | Control interno | Control interno |
| Cy5 | NDM | KPC |
| Rox | OXA48
| OXA23 |
Parámetros técnicos
| Almacenamento | ≤-18 ℃ |
| Vida útil | 12 meses |
| Tipo de exemplar | Esputo, colonias puras, hisopo rectal |
| Ct | ≤36 |
| CV | ≤5,0% |
| LOD | 103CFU/ML |
| Especificidade | a) O kit detecta as referencias negativas da empresa normalizada e os resultados cumpren os requisitos das referencias correspondentes. b) Os resultados da proba de reactividade cruzada demostran que este kit non ten reacción cruzada con outros patóxenos respiratorios, como Klebsiella pneumoniae, Acinetobacter baumannii, Pseudomonas aeruginosa, Streptococcus pneumoniae, Neisseria meningitidis, Haemococcus, Klebsiellae O oxytoco, Haemphilus, Klebsiella Influenzae, Acinetobacter junii, Acinetobacter hemolyticus, Legionella pneumophila, Escherichia coli, Pseudomonas fluorescens, Candida albicans, Chlamydia pneumoniae, etenovirus, enterocco, sme, shv, TEAMPLE, TEAMS. c) Anti-interferencia: mucina, minociclina, gentamicina, clindamicina, imipenem, cefoperazona, meropenem, ciprofloxacina hidrocloruro, levofloxacina, ácido clavulánico, roxitromicina non se seleccionou para a interferencia e os resultados mostran que a roxitromicina interferida á detección de Xenes de resistencia ao carbapenem KPC, NDM, OXA48, OXA23, VIM e Imp. |
| Instrumentos aplicables | Sistemas de PCR en tempo real Applied Biosystems 7500 Sistemas de PCR en tempo real Quantstudio®5 SLAN-96P Sistemas PCR en tempo real (Hongshi Medical Technology Co., Ltd.) Sistema PCR en tempo real lightcycler®480 Linegene 9600 Plus Sistema de detección de PCR en tempo real (FQD-96A，HangzhouTecnoloxía Bioer) Cycler térmico cuantitativo en tempo real MA-6000 (Suzhou Malarray Co., Ltd.) BIORAD CFX96 SISTEMA PCR en tempo real BIORAD CFX OPUS 96 SISTEMA PCR en tempo real |
Fluxo de traballo
Opción 1.
Reactivo de extracción recomendado: Macro e Micro-proba Kit xeral de ADN/ARN (HWTS-3019-50, HWTS-3019-32, HWTS-3019-48, HWTS-3019-96) (que se pode usar con extractor de ácido nucleico automático macro e micro-proba (HWTS-3006C, HWTS-3006B)) por Jiangsu Macro & Micro-Test Med-Tech Co., Ltd .. Engade 200 μl de salina normal a o talo precipitado. Os pasos posteriores deben seguir as instrucións para a extracción e o volume de elución recomendado é100 µl.
Opción 2.
Reactivo de extracción recomendado: reactivo de extracción ou purificación de ácido nucleico (YDP302) de Tiangen Biotech (Beijing) Co., Ltd. A extracción debería iniciarse en estrito paso co paso 2 da instrución para o seu uso (engadir 200 μl de buffer GA ao talo precipitado do talón e axita ata que o talo estea completamente suspendido). Use a auga libre de RNase/DNase para a elución e o volume de elución eCommended é de 100 µl.
Opción 3.
Reactivo de extracción recomendado: reactivo de liberación de mostras macro e micro-test. Hai que lavar a mostra de esputo engadindo 1 ml de solución salina normal ao precipitado de talo tratado anteriormente mencionado, centrifugado a 13000R/min durante 5 minutos, e o sobrenadante é descartado (garda 10-20 µl de sobrenadante). Para a colonia pura e o tampón rectal, engade 50 μl de reactivo de liberación de mostras directamente ao precipitado de talo tratado anteriormente mencionado, e os pasos posteriores deberían extraerse segundo a instrución para o seu uso.
